可測(cè):游離氨基酸和水解氨基酸;
游離氨基酸指:樣品中氨基酸直接以游離態(tài)存在,不需要水解前處理;
水解氨基酸指:樣品中含有蛋白質(zhì)、多肽等成分,需要通過(guò)水解等前處理將其水解成單個(gè)氨基酸再測(cè)試。
常規(guī)可測(cè)17種氨基酸:天門(mén)冬氨酸,蘇氨酸,絲氨酸,谷氨酸,脯氨酸,甘氨酸,丙氨酸,胱氨酸,纈氨酸,蛋氨酸,異亮氨酸,亮氨酸,酪氨酸,苯丙氨酸,賴氨酸,組氨酸,精氨酸;
需要測(cè)其他氨基酸需要提前咨詢確認(rèn)!
測(cè)試條件
游離氨基酸常規(guī)前處理(僅參考):
樣品加5%磺酸水楊酸沉淀蛋白(1:4),用高速冰凍離心機(jī)18000轉(zhuǎn)/min離心30min,取上清液過(guò)保存,上機(jī)前用0.45μm+0.22μm濾膜過(guò)濾后上機(jī)分析。
水解氨基酸常規(guī)前處理(僅參考):
1、準(zhǔn)確稱(chēng)取固體樣品50—200mg (根據(jù)氨基酸的大體含量,如魚(yú)粉可以少稱(chēng),水果等可以大量稱(chēng)樣),小心加入水解管中,注意:盡量防止掛壁。
2.、小心加入1:1 的分析純鹽酸(約6mol/L) 4ml
3、氮吹儀吹氮?dú)?5 分鐘后封管。
3、將封管的樣品置烘箱中 110 ℃水解 22-24 小時(shí)后,取出冷卻開(kāi)管。
4、樣品定容至100ml。
5、準(zhǔn)確吸取定容后的樣品 2ml,置氮吹儀上脫酸。溫度 60℃,脫至干燥。
6、準(zhǔn)確加入0.02mol/L HCL旋渦器上混勻,過(guò)0.22μm過(guò)濾小柱,上機(jī)。
常規(guī)檢測(cè)色譜條件(僅參考,具體已實(shí)際數(shù)據(jù)說(shuō)明為準(zhǔn)):
色譜柱規(guī)格:200mm*4.6mm ;離子交換樹(shù)脂 陽(yáng)離子樹(shù)脂層析柱 ,檢測(cè)器為紫外 ;顯色劑為茚三酮 ;緩沖液系統(tǒng)為鈉鹽 ;緩沖液流速0.2 ml/min;柱溫55 ℃, 反應(yīng)室溫138 ℃。用外標(biāo)法測(cè)定樣品溶液中游離氨基酸含量其脯氨酸檢測(cè)波長(zhǎng)為 440 nm 和其它氨基酸檢測(cè)波長(zhǎng)570 nm